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核酸檢測PCR實驗

一、PCR實驗室為負壓實驗室，無潔凈度要求；現(xiàn)考慮用于新冠肺炎的核酸檢測實驗室，要求進一步提高，P2實驗室，P3用；全新風(fēng)預(yù)處理凈化，單獨排風(fēng)，防止交叉感染；
1、PCR 實驗室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴增、產(chǎn)物分析等三或四個區(qū)域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室，有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應(yīng)完全獨立分隔，不應(yīng)有任何的空氣直通。

2、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室產(chǎn)物分析區(qū)或三個區(qū)域的最后一個區(qū)域（即擴增及產(chǎn)物分析區(qū)），空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi)，可通過在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達到空氣流由室外向室內(nèi)流動的要求。

二、 PCR實驗室各區(qū)域儀器設(shè)備配備通常如下：

1、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室試劑準(zhǔn)備區(qū): 儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈等?？墒褂贸瑑艄ぷ髋_作為試劑配制操作臺面。

2、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室標(biāo)本制備區(qū)儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜（最好為B2, 可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

此外還應(yīng)配備加樣器、臺式高速離心機（冷凍及常溫）、臺式低速離心機、恒溫設(shè)備（水浴和干浴儀）、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。

3、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室擴增區(qū)主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀（PCR儀，實時熒光或普通的）。熱循環(huán)儀的電源應(yīng)專用，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外，根據(jù)工作需要，還可配備加樣器、超凈臺等。

4、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室產(chǎn)物分析區(qū)：本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有加樣器、電泳儀（槽）、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標(biāo)儀和洗板機等。在理想情況下，PCR實驗室試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴增三個區(qū)域可設(shè)置緩沖間。在緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。